Voorbeelden van het gebruik van Mcherry in het Spaans en hun vertalingen in het Nederlands
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Separe los resultados de la adquisición mCherry y GFP en diferentes matrices.
El segmento fue fijado con 4% PFA después de 72 h en cultura yimmunostained para la GFP y mCherry.
Las partículas virales expresan una etiqueta fluorescente mCherry que se dirige a las células musgosas en la hilus(región en caja blanca).
Para el análisis de datos,el reportero inducible de GFP se normaliza a la señal constitutiva mCherry(figura 6).
HM3D(Gq)-mCherry(véase Tabla de materiales) para receptores diseño activados exclusivamente por drogas de diseño(DREADD)-mediada por la activación.
Por ejemplo, diferentes eficiencias se registraron utilizando mCherry y eGFP(datos no mostrados).
Utilizando los parámetros extraídos, es posible buscar correlaciones positivas onegativas entre los parámetros extraídos de las trayectorias GFP y mCherry.
Sólo excitar el fluoróforo donador de mCitrine y no mCherry aceptador fluoróforo y excitar así en 516 nm y recoger la emisión de 521-565 nm.
(B, E)Superposición de imágenes de embriones inyectados con in vitro transcritas mCherry en fluorescencia y DIC canales.
MCherry en las lesiones del ADN fue blanqueado al nivel de fondo(forma dispersa de la proteína de la proteína 53BP1 mCherry), y la fluorescencia del fondo fue restada de cada valor.
Una vez realizadas todas estas correcciones,las trayectorias de crecimiento cuantitativo de las bacterias que expresan mCherry- y GFP podrían ser trazadas.
NOTA: En experimentos que involucran el co-cultivo de cepas GFP y mCherry, se debe analizar un chip mCherry sólo para determinar la relación entre mCherry y autofluorescencia verde.
Tener en cuenta la información general que la máxima excitación/emisión de GFP es 395/509 nm yla máxima excitación/emisión de mCherry es 587/610 nm(véase fluorocromos utilizados aquí en la figura 2B).
El reportero EGFP y el control de mCherry se albergaban en el mismo plásmido pero se encajan en dos cassettes de expresión independiente teniendo dos promotores independientes.
(Arriba) Las neuronas eran retrógradas etiquetados usando un virus de la rabia mCherry modificado y entonces reflejada antes axotomía en 24 días en la cultura.
Otro conjunto de ovariolas en buffer de disección nigericin a pH 7.5 la imagen y ajustar la configuración de tal manera quelas intensidades de los píxeles de las imágenes pHluorin y mCherry están alta, pero no saturado.
La acumulación de juxtanuclear de mCherry probablemente es causada por una mayor resistencia del fluoróforo mCherry lysosomal degradación en comparación con el fluoróforo mCitrine.
Dividir la intensidad de fluorescencia media del canal pHluorin por la intensidad de fluorescencia media del canal mCherry para calcular un cociente de pHluorin fluorescencia mCherry.
Se describen técnicas para expresar mCherry::pHluorin en el linaje FSC, manteniendo el tejido ovárico durante la proyección de imagen, vivo y adquirir y analizar imágenes para obtener valores de pHi.
Imagen ovariolas en buffer de disección nigericin a pH 6.5 y ajustar la configuración tal queintensidades de píxeles de las imágenes pHluorin y mCherry son bajos, pero no debajo de los límites de detección de la cámara de.
De esta manera, mCherry expresión se relaciona con la eficiencia de transfección y recuento de células, pero es independiente de la expresión de EGFP, de modo que la fluorescencia verde medida puede normalizarse a la fluorescencia roja.
Típicamente, un promotor de potencial se clona aguas arriba de un promotor basal(como hsp70l 29) y el gen reportero fluorescente tal comoEGFP(proteína fluorescente verde potenciada) o mCherry en una cadena principal de Tol2 y se inyecta con transposasa mRNA 26.
Tenga en cuenta que la señal de fluorescencia de la mCitrine y mCherry señales hace no totalmente traslapo, probablemente debido a una menor resistencia de mCitrine a la degradación lisosomal comparada mCherry(véase la sección discusión).
Brevemente, las células HEK 293T se transfectan con el vector de expresión lentiviral Pcdh con el objetivo EF-1promotor que dirige la expresión de verde fluorescenteproteína(eGFP) o mCherry, una proteína fluorescente de color rojo, y un sistema de envasado de tercera generación.
De hecho, este protocolo fue adaptado de un protocolo para el uso de mCherry::pHluorin para medir la pHi en la Drosophila ojo7yhemos utilizado metodología similar a la imagen mCherry::pHluorin en el cerebro de larvas.
Para visualizar la maduración de las neuronas y el desarrollo de la columna vertebral dendrítica, el virus de la rabia modificado se entregó al compartimento axonal en el día 29 para retrógrado lasneuronas de la etiqueta, incluidas las espinas dendríticas, con proteína fluorescente mCherry.
Las inserciones cromosómicas de los genes mCherry o GFP facilitan la expresión constitutiva de proteínas fluorescentes con distintas longitudes de onda de emisión que pueden usarse para monitorear la abundancia y ubicación de los miembros de la comunidad dentro de cada micropocillo.
Como el EGFP N segmento corriente arriba que del codón de parada(gris) no es fluorescente, el rendimiento de larga duración EGFP(verde)directamente se corresponde con la eficacia de la incorporación de la ncAA, mientras mCherry(rojo) proporciona una referencia independiente para la normalización.
Se muestra una célula expresan sintaxina 4-mCitrine(donante fluoróforo) con VAMP3-mCherry(fluoróforo aceptor), así como las condiciones de control de las células que expresan sólo la sintaxina 4 mCitrine construir(donante sólo, sin traste)y sintaxina 3 fusionado a ambos mCitrine y mCherry en tándem(máxima esperable traste).
Un enfoque alternativo es rotular diferentes estructuras subcelulares u organelos con diversos marcadores como la proteína de fluorescencia verde(GFP), proteína de la fluorescencia roja(RFP),proteína de fluorescencia amarilla(YFP) y mCherry, y mientras tanto la proteína de la etiqueta interés con otros marcadores.